以NADP+作色原底物测量CKMB时活性大于CK的原因

发布时间:

2021-10-21


肌酸酶CK由M及B两种亚基组成,有MM、MB、BB三种同工酶,CKMB是肌酸激酶同工酶,其作用是在生理水平上维持细胞内的能量物质三磷酸腺苷ATP浓度,可作为急性心肌梗塞的诊断依据。那为什么检测时会出现CKMB活性大于CK呢?

目前常用的检测CKMB的方法是免疫抑制法,出现CKMB>CK的情况就是由这种方法的检测原理造成的。在人体中正常情况下CKBB很少,可忽略,而免疫抑制法就是建立在忽略CKBB的基础上的。即是用抗体抑制M亚基,所以CKMM会失去活性,而CKMB活性失去一半。这样测出的CK活性实际就是CKMB的一半,所以CKMB活性应该为测定的2倍。但如果CKBB存在就会使结果偏高,即测定的CKMB活性=CKMB+2CKBB。

酶法以NADP+作色原底物测量CKMB原理

如果CKBB>CKMM,由于结果要乘2,也就是说2CKBB+CKMB>CKBB+CKMB+CKMM,即测定得的CKMB活性>CK活性。 所以测出的CKMB>CK是可能的的,但CKMB>2CK是不可能的。

CK-MB可以比CK高, 只要CKMB的升高不是由于溶血造成的,CKMB >CK,这样的病例95%是O型或B型血的癌症患者,原因是部分癌症病人免疫系统混乱,其中的一些免疫球蛋白充当的辅酶的作用。 

CK-MB大于CK是因为检测的时候封闭了M亚基,忽略了B亚基,将CK-BB算成了2倍,当血清中含有大量的CK-BB同工酶且大于CK-MM时,会导致CK-MB>CK。而人的脑组织中含有大量的CK-BB,所以当CK-MB大于CK时,有可能已经引起了脑部的损伤,这种情况尤其多见于新生儿窒息的情况。

以酶法测定CKMB的活性,实际是间接测量,抑制M亚基后通过ADP的在CK等酶的一系列催化反应,以色原底物NADP+作为显色试剂用光度计测量数据,以CK测定试剂测得CK-B活力,再计算得数据。除了方法原因可能造成其活性大于CK总活性之外,当然也有其它的原因。

肌酸酶,色原底物