显色底物DA-67的应用原理及使用方法
发布时间：
2022-08-27
显色底物DA-67是生物体恒量组分分析检测中的中间代谢物，它的CAS号为：115871-18-6，外观是白色的粉末，值得注意的是它的储存对温度是有要求的，需要在2-10℃的条件下保存，所以在常温情况下运输的话，需要放置冰袋并使用泡沫箱进行包装。
DA-67的应用原理
DA-67与过氧化物酶配合使用时，可以展现出对过氧化氢的高敏锐度，它是一种水溶性氧化显色试剂。相比传统的显色试剂来说，它不但具有吸光度低、灵敏度高的特点，更值得一提的是，相比其他的显色试剂DA-67的水溶性要好，以1 mmol/L以上的浓度，10毫克可溶于25毫升的水中。同时兼容了以上几个优点，需要用简单的比色法就能较快的获取结果，大大的加大了检测效率，所以DA-67常用于生物成分样本分析中。
使用DA-67测定过氧化氢定量的方法
1、准备4.08毫克的DA-67粉末、1 mL100 units/mL的过氧化物酶、0.1mol/L, pH=7, Triton X-100 0.5% 的PIPES缓冲液；
2、将准备好的DA-67粉末、过氧化物酶放入PIPES缓冲液中，定容至100 mL（DA67 100 μmol/L溶液）；
3、取3ml配置好的溶液，与10μL样本溶液（H2O2:0~5 mmol/L）混合；
4、在37℃的条件下孵育5分钟；
5、用分光光度计检测666 nm处的吸光度，以空白（用蒸馏水替换样本溶液混合成的溶 液）的吸光度差作为检测值，用单独制备的校准曲线确定样本中的含量即可。
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DA-67,新型Trinder’s试剂
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