HEPES是怎样制备的?来看看这家公司说明
发布时间:
2024-06-29
HEPES(4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸)是一种常用的缓冲剂,因其在pH范围内具有较强的缓冲能力,广泛应用于生物化学和细胞生物学实验中。HEPES的合成过程较为复杂,涉及多个步骤和化学反应。公海710官网客服作为生产厂家,它在这里给大家做个说明,帮助较好地理解和使用这一缓冲剂。

(HEPES桶装)
一、HEPES具体制备合成步骤
步骤1:制备羟乙基哌嗪
(1)将六水合哌嗪溶于乙醇中,形成透明无色的溶液。
(2)在80摄氏度保温条件下,边回流的同时加入环氧乙烷。
(3)待反应结束后,减压蒸馏除去乙醇,真空分流分离提纯残留物。
(4)在沸程125-127摄氏度下收集馏出物羟乙基哌嗪。
在这个步骤中,哌嗪和环氧乙烷发生反应,生成羟乙基哌嗪。回流和减压蒸馏的过程确保了反应充分和产物的纯净。
步骤2:制备氯乙磺酸钠
1、将无水亚硫酸钠和蒸馏水加入烧瓶中,外用水浴加热。
2、当反应液达到90摄氏度时,维持此温度的情况下滴加1,2-二氯乙烷。
3、滴加完毕后继续回流。
4、反应液在70度水浴中减压浓缩,直到白色固体析出充分。
5、将固体与95%酒精中悬浮,加热回流,趁热过滤出去不溶物。
6、清液0度放置,次日用布氏漏斗抽滤,收集白色片状氯乙磺酸钠结晶。
这个步骤中,亚硫酸钠和1,2-二氯乙烷反应生成氯乙磺酸钠。通过减压浓缩和酒精回流,可以得到纯净的氯乙磺酸钠结晶。
步骤3:制备HEPES粉末
1、在烧瓶中加入羟乙基哌嗪、氯乙磺酸钠和水,110摄氏度油浴保温搅拌反应。
2、滴加氢氧化钠,使pH保持在9-10,回流至反应结束。
3、冷却后用离子交换树脂H+层析柱去盐纯化。
4、层析液减压浓缩,活性炭脱色过滤,清液浓缩,倒入沸腾酒精中,加冰醋酸调节pH,醇沉冷却得到HEPES粗品。
5、通过重结晶、清洗、干燥得到纯净的HEPES产品。
在这个步骤中,羟乙基哌嗪和氯乙磺酸钠反应生成HEPES。在反应过程中,通过滴加氢氧化钠调节pH值,确保反应的顺利进行。后通过离子交换、活性炭脱色和重结晶等过程,得到纯净的HEPES产品。
二、制备出的HEPES粉末性质应用
HEPES在pH 6.8-8.2范围内具有良好的缓冲能力,化学性质稳定,不易被细胞或细胞培养基中的成分降解,且对细胞生长和生物反应没有抑制作用。
由于这些优良特性,HEPES广泛应用于生物化学、分子生物学和细胞生物学的实验中。例如,在细胞培养中,HEPES常用于维持培养基的pH稳定;在酶促反应中,HEPES可用作缓冲剂,以确保反应在较佳pH条件下进行。

(HEPES瓶装)
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4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸,HEPES
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