DNA电泳缓冲液Tris的组成成分
在生化实验时做DNA或蛋白质电泳时,都会用到缓冲剂,比如Bicine,MOPS,EPPS,Tris等。缓冲液的作用之一是维持溶液的pH稳定。 电流通过水(H2O)时,在阳极发生氧化反应,生成氧气以及氢离子;在阴极发生还原反应,生成氢气以及氢氧根离子。长时间电泳将会使阳极变酸,阴极变碱。一个好的缓冲系统应该有较强的缓冲能力,使溶液两极的pH保持基本稳定。
2019-08-27
化学发光免疫检测中运用的微球
在化学发光免疫检测实验中,通常会用到吖啶酯、鲁米诺及AMPPD等,但这些在实验中是作为直接发光或间接发光的发光底物,在实际操作中还需要用到磁珠、微球、酶标板等来作为抗原抗体或蛋白的固相载体。本文现简单介绍下微球。
Tris-HCl缓冲液在SDS-PAGE中的应用
三羟甲基氨基甲烷Tris也叫做 氨基丁三醇;缓血酸胺;2-氨基-2-(羟甲基)-1,3-丙二醇,是一种弱碱,是常用的缓冲剂 。Tris用途广泛,通常被用来作为缓冲液来溶解核酸和蛋白质,是蛋白质电泳、DNA电泳的缓冲液的主要成分之一。 Tris常用作生物缓冲液,常配成pH值为6.8,7.4,8.0,8.8。其锚点pH值随温度变化很大。一般来说,温度每升高一度,PH值下降0.03。1M Tris-HCl 6.8和1.5M Tris-HCl 8.8是SDS-PAGE常用的试剂。
2019-08-23
采用EPPS缓冲剂的磷酸化反应
生物缓冲剂EPPS(HEPPS)即4-羟乙基哌嗪丙磺酸有很多相似于HEPES(4-羟乙基哌嗪乙磺酸)的特性。因为EPPS有高的缓冲范围,适合用于磷酸化反应,特别是Tricine不能使用的情况下。磷酸化反应是生物体内非常重要的生化反应。 磷酸化是通过磷酸转移酶(激酶)将磷酸基团加在底物上的过程。其中除去磷酸基团的酶称为磷酸酶。 蛋白质磷酸化可发生在许多种类的氨基酸(蛋白质的主要单位)上,其中以丝氨
Folin酚法检测蛋白原理及采用缓冲剂EPPS、Tris等注意事项
在Folin酚法检测蛋白含量时通常用EPPS(HEPPS)作缓冲剂。Folin—酚试剂法是由测定蛋白质浓度的基本方法,在生物化学领域得到广泛的应用。 Folin酚法的显色原理与双缩脲方法是相同的(但EPPS不能用于缩二脲/双缩脲)检测,只是加入了第二种试剂,即Folin—酚试剂,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏度。
2019-08-22
CAPS应用作HPLC分离碱性药物的缓冲液
在生化实验中常用3-环己胺基丙磺酸CAPS用作HPLC法分离碱性药物的缓冲液,那么HPLC分离的原理是什么呢? HPLC高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液(比如CAPS)等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。
2019-08-21
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